期刊简介
本刊由国家食品药品监督管理局主管，中国药学会、中国医药集团总公司和中国医药科技出版社共同主办的国家级刊物，创刊于1992年，是一份专门报道新药科研、生产、技术成果、临床应用及评介、新药质量、市场和管理方面内容，集学术、科研和信息交流服务一体，具有很强的专业性、实用性和新颖性的权威性科技情报期刊。读者对象为医药科研人员、临床医师、药师、药品生产和管理人员。本刊特色是突出“新”字，反映新内容；其次突出“两个结合”，即医与药结合、技术性与学术性结合；再是突出“实”字，有很强的实用性。
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首页>中国新药杂志
- 杂志名称：中国新药杂志
- 主管单位：国家食品药品监督管理局
- 主办单位：中国医药科技出版社 中国医药集团总公司 中国药学会
- 国际刊号：1003-3734
- 国内刊号：11-2850/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：全国中文核心期刊期刊收录：万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 国际药学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 医学文摘, 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 知网收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
人源抗BLyS单链抗体的筛选及其构建与表达
钱尼良；张晶；高柳村；万德有；冯红茹；刘蕴慧；杨懿；高新；宋海峰
关键词：B细胞, B细胞刺激因子, 哺乳动物细胞展示型人源ScFv抗体库, 单链抗体
摘要：目的:从人源单链抗体库中筛选抗B细胞刺激因子(BLyS)的单链抗体基因、构建表达载体并实现单链抗体的表达.方法:以哺乳动物细胞展示型人源ScFv抗体库为起始文库,通过流式细胞术进行分选,获得荧光强度强、比例为0.1％的阳性细胞.从候选细胞中提取质粒并转化至DH5α中进行扩增,得到质粒转染293T细胞作为下一轮筛选所需的抗体库.经过依次降低抗原浓度进行了3轮分选得到2个候选的ScFv序列.经序列分析,选择其中一种单链抗体基因,利用基因工程技术构建分泌型表达质粒,转染293E细胞并通过镍亲和层析纯化获得B-10 ScFv抗体蛋白并通过FortieBio Octet QK进行亲和力分析.结果:经过3轮筛选获得了全新的抗BLyS ScFv抗体序列,成功构建并表达了anti-BlyS ScFv抗体蛋白,该单链抗体与的BLyS亲和常数为3.08 nmol·L-1.结论:从哺乳动物细胞展示型人源ScFv抗体库中成功获得了可结合BLyS的全新单链抗体基因序列,该单链抗体与BLyS具有较高的亲和力,这为后续的活性研究以及产品开发奠定了基础.
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